由于溶劑系統(tǒng)pH變化改變了存在狀態(tài)（游離型或解離型），從而改變了在溶劑系統(tǒng)中的分配系數(shù)。pH梯度萃取法是分離酸性、堿性、兩性成分常用的手段。正是因?yàn)閜H的差異而實(shí)現(xiàn)了各生物堿的分離，氯仿為親脂性有機(jī)溶劑，總生物堿皆可溶解于氯仿，這里利用溶解度不能達(dá)到分離的效果。樣品水溶液用pH3的有機(jī)溶劑提取，此時酸性物質(zhì)多呈非解離狀態(tài)，因而溶于有機(jī)相中，堿性物質(zhì)或中性物質(zhì)呈解離狀態(tài)，存在于水相中，而達(dá)到分離的目的。pH梯度萃取法具有操作簡單、分離效果好等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、藥物分析、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。