Tris-HCl (pH8.0)提供一個緩沖環(huán)境,防止核酸被破壞。
EDTA螯合Mg2+或Mn2+離子,抑制DNase活性。
NaCl 提供一個高鹽環(huán)境,使DNP充分溶解,存在于液相中。
Cβ-巰基乙醇是抗氧化劑,有效地防止酚氧化成醌,避免褐變,使酚容易去除基因組DNA。CTAB 4gNaCl 16.364 g。
1M Tris-HCl 20ml( PH8.0)。。
0.5M EDTA 8ml,先用70ml ddH2O溶解, 再定容至200ml滅菌。
冷卻后0.2-1% 2-巰基乙醇(400ul)氯仿-異戊醇(24:1):先加96ml氯仿,再加4ml異戊醇,搖勻即可。
擴(kuò)展資料:
適當(dāng)?shù)募右幌聼幔热?0度或者60度,可以快速溶解,般這個溫度對試劑的品質(zhì)沒有什么影響如果不是濃度太高的話。
如果濃度太高,可能冷卻后又會沉淀析出來。
在高離子強(qiáng)度的溶液中(>0.7mol/L NaCl) CTAB與蛋白質(zhì)和多聚糖形成復(fù)合物而不沉淀核酸。通過有機(jī)溶劑抽提,去除蛋白、多糖、酚類等雜質(zhì)后加入乙醇沉淀即可使核酸分離出來。
2×CTAB提取緩沖液成分:2%(w/v)CTAB,100mM?Tris (pH 8.0),20mM?EDTA,1.4 MNaCl,,0.2%(v/v)?還原劑(隨用隨加)?。
參考資料來源:百度百科——十六烷基三甲基溴化銨