由于蛋白質分子中含有許多與雙縮脲結構相似的肽鍵，在堿性溶液中，雙縮脲試劑能與蛋白質反應，形成紫色絡合物．因此蛋白質的檢測作用的實驗原理是：雙縮脲試劑與蛋白質呈現紫色反應。

用來檢測雙縮脲，由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，因此也能與銅離子在堿性溶液中發生雙縮脲反應。當底物中含有肽鍵時，試液中的銅與多肽配位，絡合物呈紫色?？赏ㄟ^比色法分析濃度，在紫外可見光譜中的波長為540nm。鑒定反應的靈敏度為5-160mg/mL。

雙縮脲試劑檢測蛋白質評價：

優點：雙縮脲法測定蛋白質的測定范圍是1~10mg蛋白質，操作簡單、快捷。既適合手工操作，又適合自動化分析，重復性好、線性關系好， 雙縮脲試劑可以長期保存（ 若貯存瓶中有黑色沉淀出現，則需要重新配制）。

缺點：靈敏度差，測定范圍窄，樣品需要量大，不同的蛋白質產生顏色的深淺相近，因此它常用于需要快速，但并不需要十分精確的蛋白質測定。干擾測定的物質包括有在性質上是氨基酸或肽的緩沖液，如TrIs緩沖液，因為它們產生陽性呈色反應，銅離子也容易被還原，有時出現紅色沉淀。

以上內容參考：百度百科-雙縮脲試劑