Bradford法，也稱考馬斯亮藍法，是通過蛋白質與考馬斯亮藍結合后產生的顏色變化來測定蛋白質含量。其基本原理是，亮藍在電離狀態下顯示棕紅色，與蛋白質結合后變為藍色，吸收光峰在595nm處，吸光值與蛋白質含量成正比。反應快速，通常在2分鐘內達到平衡，且試劑制備簡單，操作簡便，靈敏度高，是微克級蛋白質測定的理想選擇。

然而，這種方法并非無懈可擊。特殊蛋白的結構和緩沖液中的干擾物質可能會對測定結果產生影響。比如，對于特定的小分子堿性多肽如核糖核酸酶或溶菌酶，以及去污劑濃度超過0.2%的情況，如TritonX-100、SDS、NP-40等，Bradford法可能無法提供準確的定量。因此，實施時需確保樣本的特性和實驗條件符合該方法的要求。

測定過程包括配制Bradford濃染液，準備標準曲線（選擇性質相近的蛋白質樣本），將待測樣本與緩沖溶液混合，稀釋染料結合溶液，讓樣本與染料反應并測定吸光度，最后通過標準曲線計算蛋白質濃度。該方法在大多數情況下都能提供精確的定量結果，但使用前需充分理解其適用范圍和潛在影響因素。