在SOD測定中,設置照光和暗中對照管是為了準確評估樣品中超氧化物歧化酶(SOD)的活性。SOD具有專一性,能夠抑制超氧陰離子自由基的形成,從而減少亞硝酸鹽的生成。當樣品中含有SOD時,與對照管相比,測定管的吸光度值會降低,因為SOD阻斷了氮藍四唑(NBT)在光下被還原的過程,從而減少了藍色甲腙的形成,顏色越深表示SOD活性越低,反之則活性越高。
這個實驗原理基于SOD對NBT還原反應的抑制作用。在有光照的條件下,核黃素會被氧化生成O,進而還原NBT為藍色甲腙。而SOD的存在會清除O,減少甲腙的生成,因此,對照管在光照下顏色的變化反映了SOD的清除能力。通過比較對照管和測定管的顏色深淺,可以計算出SOD的酶活性。
此外,超氧陰離子作為有害物質,人體內存在一種自我保護機制,通過抗氧化酶如SOD和過氧化氫酶等來清除。SOD首先將超氧陰離子轉化為過氧化氫,后者進一步被過氧化氫酶分解為水,這個過程中,如果同時使用藥用SOD和這些酶,可以更有效地清除有害物質,提升治療效果。
總的來說,對照管設置在SOD測定中的目的是為了通過對比,精確衡量SOD對自由基的清除作用,從而評估其生物活性和潛在的醫學應用價值。