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無縫克隆如何反向設計引物

導讀1、線性化目的載體:用酶切或是PCR方式。2、PCR獲取目的片段。設計的引物5’端需要和線性化載體末端有15~25bp的重疊。3、按照一定比例把二者混合在HB-infusion(無縫克隆試劑盒)的2×預混液內,50℃反應20min后直接轉化Ecoli即可。

無縫克隆反向設計引物方法如下:1、線性化目的載體:用酶切或是PCR方式;2、PCR獲取目的片段。設計的引物5’端需要和線性化載體末端有15~25bp的重疊;3、按照一定比例把二者混合在HB-infusion(無縫克隆試劑盒)的2×預混液內,50℃反應20min后直接轉化Ecoli即可。

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