氨基酸混合物紙層析遷移順序靜止不動。紙層析法（paperchromatography）是生物化學上分離、鑒定氨基酸混合物的常用技術，可用于蛋白質的氨基酸成分的定性鑒定和定量測定。紙層析法是用濾紙作為惰性支持物的分配層析法，其中濾紙纖維素上吸附的水是固定相，展層用的有機溶溶劑是流動相。在層析時，將樣品點在距濾紙一端約2～3cm的某一處，該點稱為原點。然后在密閉容器中層析溶劑沿濾紙的一個方向進行展層，這樣混合氨基酸在兩相中不斷分配，由于分配系數（Kd）不同，結果它們分布在濾紙的不同位置上。物質被分離后在紙層析圖譜上的位置可用比移值（rateofflow，Rf）來表示。所謂Rf，是指在紙層析中，從原點至氨基酸停留點（又稱為層析點）中心的距離（X）與原點至溶劑前沿的距離（Y）的比值：在一定條件下某種物質的Rf值是常數。Rf值的大小與物質的結構、性質、溶劑系統、溫度、濕度、層析濾紙的型號和質量等因素有關。