吖啶酯化學(xué)發(fā)光原理主要是在堿性過(guò)氧化氫（H2O2）溶液中，吖啶酯的分子受到過(guò)氧化氫離子的進(jìn)攻。此時(shí)，吖啶環(huán)上的取代基與C-9位的氫原子和過(guò)氧化氫形成不穩(wěn)定的二氧乙烷。這個(gè)二氧乙烷隨后分解為二氧化碳（CO2）和一個(gè)電子激發(fā)態(tài)的N-甲基吖啶酮。當(dāng)這個(gè)激發(fā)態(tài)的N-甲基吖啶酮回到基態(tài)時(shí)，會(huì)發(fā)出光子，即產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。此外，吖啶酯也可以作為示蹤物質(zhì)標(biāo)記抗原或抗體分子，形成發(fā)光標(biāo)志物。在堿性環(huán)境中，這些標(biāo)記物與相應(yīng)的抗原或抗體結(jié)合后，加入氧化劑（如過(guò)氧化氫）可以誘導(dǎo)結(jié)合的標(biāo)志物發(fā)光。通過(guò)測(cè)定發(fā)光強(qiáng)度，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)超微量物質(zhì)的定量分析。