分光光度計是理化分析中廣泛應(yīng)用的儀器，其基本原理基于光與物質(zhì)的相互作用。當(dāng)光子與溶液中的吸收物質(zhì)分子碰撞時，會發(fā)生吸收現(xiàn)象。通過測量吸光度值的大小，可以反映某種物質(zhì)存在的濃度。比爾定律指出，光的吸收程度與濃度成正比，但需要使用單色光（單一波長光）照射樣品，并且吸光度值應(yīng)控制在0.2～0.7之間。此外，要求單色光垂直照射樣品，確保試樣均勻。一臺性能優(yōu)良的分光光度計需配備高性能的光路系統(tǒng)，即單色儀。單色儀有兩種類型：玻璃三棱鏡和光柵。玻璃三棱鏡單色儀在紫外光區(qū)具有較高色散率和波長精度，但在可見光區(qū)波長精度較低；而由光柵制成的單色儀在全段波長范圍內(nèi)具有相同的波長精度，但波長精度較低。選擇分光光度計時需考慮工作需求，如制藥廠需高精度測量，以確保準(zhǔn)確測定最大吸收值。分光光度計的日常維護(hù)同樣重要。由于分光光度計是高阻儀器，易受潮濕影響，環(huán)境濕度需控制在<85%。溫度過高也會導(dǎo)致儀器讀數(shù)不穩(wěn)定，實驗室溫度應(yīng)保持在10℃～25℃之間。定期更換儀器的硅膠，并定期開機(jī)，可確保儀器正常運行和數(shù)據(jù)穩(wěn)定。此外，比色器的選擇也至關(guān)重要。紫外光區(qū)使用石英比色皿，可見光區(qū)使用玻璃比色皿。石英比色皿適用于全波段，而玻璃比色皿只能用于340nm以上波長。使用過程中，比色皿易受污染，配套性變差時需及時清洗。污染嚴(yán)重的比色皿需用重鉻酸鉀洗液清洗。每次裝入比色皿的溶液不宜過滿，一般裝2/3即可，倒溶液時要小心，避免擦洗進(jìn)光面，以防磨損影響透過率。定期檢定或校準(zhǔn)分光光度計，以確保其準(zhǔn)確性和可靠性。若經(jīng)修理后，需重新檢定合格后方可使用。