α–淀粉酶制劑活力測定方法
α–淀粉酶制劑活力測定方法
接下來,在25mm×250mm的試管中,需加入2%可溶性淀粉溶液20ml,并且加入5mlpH6.0磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液。隨后,將試管置于60℃水浴中平衡約5分鐘。之后,加入預先用緩沖液稀釋好的酶液0.5ml,并立即開始計時,同時充分混勻。在反應過程中,每隔1分鐘取出1ml反應液,加入預先準備的3ml比色稀碘液試管中。重復上述步驟,直到試管中的顏色與標準管顏色一致,即為反應終點。需要注意的是,整個反應應在3分鐘內達到終點,若反應時間超出范圍,則需重新調節(jié)樣品或酶的稀釋度。
導讀接下來,在25mm×250mm的試管中,需加入2%可溶性淀粉溶液20ml,并且加入5mlpH6.0磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液。隨后,將試管置于60℃水浴中平衡約5分鐘。之后,加入預先用緩沖液稀釋好的酶液0.5ml,并立即開始計時,同時充分混勻。在反應過程中,每隔1分鐘取出1ml反應液,加入預先準備的3ml比色稀碘液試管中。重復上述步驟,直到試管中的顏色與標準管顏色一致,即為反應終點。需要注意的是,整個反應應在3分鐘內達到終點,若反應時間超出范圍,則需重新調節(jié)樣品或酶的稀釋度。
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在進行α-淀粉酶活力測定的過程中,首先需要準備標準管作為顏色對比基準。具體操作為,在比色試管中加入1ml標準糊精溶液和3ml標準稀碘液,充分混勻后,即可作為顏色對比的標準管。接下來,在25mm×250mm的試管中,需加入2%可溶性淀粉溶液20ml,并且加入5mlpH6.0磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液。隨后,將試管置于60℃水浴中平衡約5分鐘。之后,加入預先用緩沖液稀釋好的酶液0.5ml,并立即開始計時,同時充分混勻。在反應過程中,每隔1分鐘取出1ml反應液,加入預先準備的3ml比色稀碘液試管中。重復上述步驟,直到試管中的顏色與標準管顏色一致,即為反應終點。需要注意的是,整個反應應在3分鐘內達到終點,若反應時間超出范圍,則需重新調節(jié)樣品或酶的稀釋度。最后,根據(jù)公式計算α-淀粉酶活力:酶活力單位(g/ml)=(60/T×20×2%×N)÷0.5。其中,60代表酶活定義中反應時間為60分鐘;T為反應時間(分鐘);20為可溶性淀粉的毫升數(shù);2%為可溶性淀粉濃度;N為酶液稀釋倍數(shù);0.5為測定時所用酶液量(毫升)。通過上述步驟,可以準確測定α-淀粉酶的活力,從而為后續(xù)研究提供可靠的數(shù)據(jù)支持。
α–淀粉酶制劑活力測定方法
接下來,在25mm×250mm的試管中,需加入2%可溶性淀粉溶液20ml,并且加入5mlpH6.0磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液。隨后,將試管置于60℃水浴中平衡約5分鐘。之后,加入預先用緩沖液稀釋好的酶液0.5ml,并立即開始計時,同時充分混勻。在反應過程中,每隔1分鐘取出1ml反應液,加入預先準備的3ml比色稀碘液試管中。重復上述步驟,直到試管中的顏色與標準管顏色一致,即為反應終點。需要注意的是,整個反應應在3分鐘內達到終點,若反應時間超出范圍,則需重新調節(jié)樣品或酶的稀釋度。
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