鐵銹的主要成分是氧化鐵（Fe2O3），當它與草酸（HOOCCOOH）反應時，會發生以下化學變化：Fe2O3 + 3HOOCCOOH → Fe2(OOCCOO)3 + 3H2O。這個反應會產生黃色的Fe3+離子，其顏色的深淺取決于離子濃度。在實驗中，使用的可能是含有鐵銹的鐵塊或鐵釘。這些材料中的鐵單質會與Fe3+離子反應，生成Fe2+離子：2Fe + Fe3+ → 3Fe2+。因此，溶液中Fe3+離子的濃度會減少，導致溶液顏色由黃色變為淺綠色，這是因為Fe2+離子在溶液中呈淺綠色。隨著時間的推移，溶液中的Fe2+離子可能會被空氣中的氧氣氧化，產生Fe3+離子：4Fe2+ + O2 + 4HOOCCOOH → 4Fe3+ + 4OOCCOO- + 2H2O（草酸過量時）。這會使溶液顏色再次變化，變為草酸鐵溶液的黃色。如果草酸濃度不足，溶液可能呈現中性環境，此時Fe2+離子會被氧氣氧化成Fe3+離子，并生成氫氧根離子：4Fe2+ + O2 + 2H2O → 4Fe3+ + 4OH-。氫氧根離子與Fe3+離子反應形成白色沉淀Fe(OH)2，后者會吸附Fe3+離子而呈現黃白色。在實驗中，向綠色草酸亞鐵溶液中加入NaOH，首先會形成白色沉淀Fe(OH)2，隨后迅速被氧氣氧化成紅褐色沉淀Fe(OH)3：4Fe(OH)2 + O2 + 2H2O → 4Fe(OH)3。這一氧化過程迅速發生，因此觀察到的是紅褐色沉淀，而不是Fe3+離子直接與NaOH反應的結果。