該實(shí)驗(yàn)二抗孵育時(shí)間是1-2小時(shí)。按照適當(dāng)比例用封閉液稀釋辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗。吸盡洗滌液后，立即加入稀釋好的二抗，室溫或4℃在搖床上緩慢搖動(dòng)孵育1~2小時(shí)后，回收二抗。孵育時(shí)間的設(shè)定主要是為了確保二抗能夠充分地與一抗結(jié)合。孵育時(shí)間過(guò)短，會(huì)導(dǎo)致二抗與一抗的結(jié)合不充分，影響到后續(xù)的信號(hào)檢測(cè)。
綜合
