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上下游引物tm值相差太大,怎么選退火溫度

導讀2、用primer5(oroligo6)計算，引物配對好后，primer5可以顯示Tm，我認為這個值就是退火溫度，我的經驗再加2or3度最好。

1、退火溫度等于4乘(G加C)加2乘(A加T)減(5至8)只是粗算，有時不靈，但比較簡便。2、用primer5(oroligo6)計算，引物配對好后，primer5可以顯示Tm，我認為這個值就是退火溫度，我的經驗再加2or3度最好。

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