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用槍頭挑取單菌落的注意事項

導讀2、注意假陽性:得到預期大小的擴增片段,并不意味著片段內沒有突變或者缺失。一定要送多個陽性克隆去測序,驗證序列后再進行下一步實驗。3、使用陽性對照:好的對照是轉化有相同骨架的質粒的菌株,陽性對照不能擴增出任何條帶,就很容易確定應該是somethingwrong,不管是PCR體系建立或者是引物設計。4、使用陽性對照:好的陰性對照為與你轉化使用的、不含質粒的菌株。

1、不要挑取一個菌落太多:菌落的大小跟菌落的生長時間,平板的大小,菌落數量,插入片段是否毒性基因等有關。2、注意假陽性:得到預期大小的擴增片段,并不意味著片段內沒有突變或者缺失。一定要送多個陽性克隆去測序,驗證序列后再進行下一步實驗。3、使用陽性對照:好的對照是轉化有相同骨架的質粒的菌株,陽性對照不能擴增出任何條帶,就很容易確定應該是somethingwrong,不管是PCR體系建立或者是引物設計。4、使用陽性對照:好的陰性對照為與你轉化使用的、不含質粒的菌株。

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