凱氏定氮法的優(yōu)點:可用于所有食品的蛋白質(zhì)分析中;操作相對比較簡單;實驗費用較低;結(jié)果準確,是一種測定蛋白質(zhì)的經(jīng)典方法;用改進方法(微量凱氏定氮法)可測定樣品中微量的蛋白質(zhì)。
缺點:最終測定的是總有機氮,而不只是蛋白質(zhì)氮;實驗時間太長(至少需要2h才能完成);精度差,精度低于雙縮脲法;所用試劑有腐蝕性。?
分光光度法的優(yōu)點:靈敏度高;儀器設備簡單,操作簡便、快速;應用廣泛。
缺點是:準確度相對不高;有的檢測不可用,有限制性。
蛋白質(zhì)與硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質(zhì)分解,分解的氨與硫酸結(jié)合生成硫酸銨。然后堿化蒸餾使氨游離,用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標準溶液滴定,根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù),并換算成蛋白質(zhì)含量。
擴展資料:
在有催化劑的條件下,用濃硫酸消化樣品將有機氮都轉(zhuǎn)變成無機銨鹽,然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨,隨水蒸氣蒸餾出來并為過量的硼酸液吸收,再以標準鹽酸滴定,就可計算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定,可由其氮量計算蛋白質(zhì)含量,故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。
物質(zhì)與光作用,具有選擇吸收的特性。有色物質(zhì)的顏色是該物質(zhì)與光作用產(chǎn)生的。即有色溶液所呈現(xiàn)的顏色是由于溶液中的物質(zhì)對光的選擇性吸收所致。
由于不同的物質(zhì)其分子結(jié)構(gòu)不同,對不同波長光的吸收能力也不同,因此具有特征結(jié)構(gòu)的結(jié)構(gòu)集團,存在選擇吸收特性的最大實收波長,形成最大吸收峰,而產(chǎn)生特有的吸收光譜。
參考資料來源:百度百科——凱氏定氮法
參考資料來源:百度百科——分光光度法