1.反應速度 　　大多數酶促反應是可逆反應，其速度既受底物濃度的影響，也受產物生成量的影響。當底物濃度較高時，在反應的初期，其濃度變化甚微，產物生成量也很少，此時反應速度可看作是恒定的。酶反應動力學中所指速度就是反應的初速度。 　　2.底物濃度 　　米氏方程ν=νmax[S]/Km+[S]是反映酶促反應速度與底物濃度關系的方程式，其中Km稱米氏常數。 　　Km值是酶的特征常數之一，只與酶的性質有關，而與酶濃度無關。不同的酶，Km值不同。同一個酶有幾種底物時，則對每一種底物各有一特定的Km值，其中Km值最小的底物一般稱為該酶的最適底物或天然底物。 　　綜上所述，根據酶的特性及定量原理，測定酶活力時，必須注意以下幾點： 　　（1）酶促反應過程中，只有最初一段時間內反應速度與酶濃度成正比，隨著反應時間的延長，反應速度即逐漸降低。 　　（2）要規定一定的反應條件，如時間、溫度、pH等，并在酶測定過程中保持這些反應條件的恒定，如溫度不得超過規定溫度的士1℃，pH應恒定。 　　（3）配制的底物濃度應準確且足夠大，底物液中應加入不抑制該酶活力的防腐劑并保存于冰箱中，以防止底物被分解。 　　（4）標本要新鮮，由于絕大多數酶可因久置而活力降低，標本如無法及時測定，應保存于冰箱中。用血漿時，應考慮到抗凝劑對酶反應的影響。有些酶在血細胞、血小板中的濃度比血清高，為此在采血、分離血清時，應注意防止溶血和白細胞的破裂。 　　（5）在測定過程中，所用儀器應絕對清潔，不應含有酶的抑制物，如酸、堿、蛋白沉淀劑等。