當使用無菌移液管接種不同濃度的水樣時,推薦從最低濃度開始操作的主要原因是為了最小化操作過程中的誤差和干擾。從低濃度到高濃度,移液管上殘留的少量低濃度液體對高濃度液體的影響微乎其微,可以忽略不計。相反,如果從高濃度開始,移液管上殘留的高濃度液體則可能對后續的低濃度液體產生顯著影響,導致測量結果不準確。
操作步驟如下:首先,確保移液管已進行無菌處理,然后吸取低濃度的水樣,注入無菌培養皿,再逐步移液到更高濃度的培養基中。這樣做可以確保每次轉移的液體對后續步驟影響最小。例如,將1mL水樣充分混勻后,注入50℃左右的營養瓊脂培養基中,快速攪拌均勻,形成平板。每個水樣需要制作三個平板,一個作為空白對照。
實驗結果的計算方法是:在37℃恒溫箱中培養24小時后,計數平板上生長的菌落數,取三個平板菌落總數的平均值,即為1mL水樣中的細菌總數。這種方法確保了數據的準確性和可靠性。