橋式PCR是一種特殊設計的聚合酶鏈反應(PCR)技術,它通過獨特的機制確保了更高的特異性和效率。它的核心原理在于利用引物的互補性,使得在PCR過程中每個擴增循環中,會在模板DNA的兩端各生成一個DNA分子,形成一個DNA“橋”,這樣就避免了非特異性的無根據復制,提高了擴增的特異性。
橋式PCR的步驟包括:首先,引物以其5'端與模板DNA的特定區域結合,引導DNA的擴增;接著,早期階段,引物會在模板DNA的上下游形成未擴增的橋狀結構;最后,在后期,電荷離子促使橋結構斷裂,產生兩個擴增產物。這種設計使得擴增產物直接來自模板的兩端,減少了非特異擴增的可能性。
相比于傳統PCR,橋式PCR具有顯著優勢。傳統PCR在擴增復雜基因組時,非特異性擴增產物較多,而橋式PCR通過獨特的橋結構避免了這種情況,確保了更高的擴增特異性。此外,橋式PCR還提高了擴增效率,因為它在早期就能生成更多的DNA分子,從而加快了PCR反應的速度。因此,橋式PCR在DNA測序、基因克隆和突變分析等應用中表現出色,尤其適合需要高特異性的研究場景。