比色皿在光度分析中扮演著重要角色，但若選擇或使用不當，可能會導致測量誤差，這往往被實驗人員忽視。因此，掌握比色皿的正確選擇、使用及其注意事項至關重要。比色皿的制造工藝大致有兩種：一種是通過粘合劑粘合而成，另一種則是高溫熔融而成。比色皿的材料主要為石英、熔凝硅石和光學玻璃。玻璃比色皿對紫外線幾乎全部吸收，而石英比色皿的吸光度相對較小。因此，在選擇時需考慮使用波長。低于350nm的紫外光譜區，必須使用石英或熔凝硅石制成透光面的石英比色皿。而普通硅酸鹽光學玻璃制成的透光面的比色皿，則只能用于350nm至2000nm的可見及近紅外光譜區域。因此，選擇比色皿時，應根據使用的波長來確定。正確使用比色皿時，應確保其透光面完全平行且垂直置于比色皿架中。這有助于保證進射光垂直于透光面，減少光的反射損失，確保光程固定。對于有方向標記的比色皿，應以標記為準；無標記的比色皿需自行校正方向，確保測量準確性。比色皿校正方法是將純凈的蒸餾水注入比色皿中，將吸收最小的比色皿的吸光度置為零，以此為基準，測出其他比色皿的相對吸光度。同一組比色皿間的差異應小于測定誤差，否則需進行校正。在測定同一溶液時，吸光度差值應小于0.5%，否則需校正。某些實驗室會用濾紙墊在比色皿架中，以吸附殘液，防止比色皿架受腐蝕。但若濾紙厚度或角度不當，會造成測量誤差。因此，應避免使用濾紙，確保比色皿透光面垂直于進射光路。比色皿使用時需注意：拿取時只能接觸兩側的毛玻璃，避免接觸光學面；不得將光學面與硬物或臟物接觸；溶液高度應為比色皿的2/3處，光學面如有殘液可用濾紙輕輕吸附，再用鏡頭紙或絲綢擦拭；含有腐蝕玻璃物質的溶液不得長期存放于比色皿中；使用后應立即用水沖洗，必要時可用1:1鹽酸浸泡，然后用水沖洗；不能將比色皿放在火焰或電爐上加熱或干燥箱內烘烤；如對測量結果有懷疑，可自行檢測比色皿。無論選擇玻璃還是石英比色皿，都必須配對使用，即玻璃配玻璃，且型號寬度應一致。