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原因如下:1、酶切條件不當(dāng):酶切條件包括酶的類型、反應(yīng)溫度、反應(yīng)時(shí)間、反應(yīng)緩沖液等,這些條件設(shè)置不當(dāng),會(huì)導(dǎo)致酶切不完全,甚至把質(zhì)粒切碎。2、酶失活:酶失活會(huì)導(dǎo)致酶的活性下降,不能正常進(jìn)行酶切反應(yīng)。3、內(nèi)切酶稀釋不當(dāng):酶切體系中的內(nèi)切酶稀釋不當(dāng),會(huì)導(dǎo)致酶切效果不佳,甚至把質(zhì)粒切碎。