蠟筆小新的幼兒園里，老師們的角色各有特色。園長由高倉文太擔任，他是一位和藹可親的長者，總是耐心地解答孩子們的問題。副園長則是園長的得力助手，雖然名字未提及，但他在日常管理中起到了重要作用。園長太太高倉太太則是一位溫柔的家庭主婦，為孩子們準備營養均衡的午餐。向日葵班的老師吉永綠是出場次數最多的老師之一。她別稱阿綠、小綠，或者小綠綠（當她和丈夫去澳洲度蜜月時，小新親切地這樣稱呼她）。吉永綠老師以其耐心和細致的性格深受孩子們喜愛，經常用溫柔的話語鼓勵孩子們勇敢地表達自己。在吉永綠老師的帶領下，向日葵班的孩子們學會了分享和合作，形成了一個溫馨和諧的班級氛圍。玫瑰班的松坂梅老師也是一位非常敬業的老師。她以她的耐心和細致贏得了孩子們的喜愛。而櫻花班的上尾增美老師則以她的活力和熱情激勵著孩子們探索世界的美好。盡管出場次數較少，但上尾增美老師同樣給孩子們留下了深刻的印象。這些老師不僅負責教授孩子們知識，更在他們成長的道路上扮演著重要角色。通過與老師的互動，小新和他的朋友們學會了如何與人相處，如何面對挑戰，以及如何勇敢地追求自己的夢想。