△△Ct這是相對熒光定量的一個計算公式的簡化形式,用于比較不同樣品之間的差別或變化比率。
Ct= -k lgX0+ b(線性方程)用這個方程可以通過Ct值算出樣品的起始濃度
斜率=-1/lg(1+e)
擴增效率E=1, 斜率=-3.32
擴增效率范圍:90%-110%
斜率范圍:-3.1和-3.59之間
例如,想看a基因和b基因在某細胞系中表達量的差別,選取18s作為內參基因,就用a基因的Ct值減去18s的Ct值,得到△Ct1,用b基因的Ct值減去18s的Ct值得到△Ct2,然后用△Ct1-△Ct2=△△Ct,而a,b基因的表達量差別為2(-ΔΔCt)次方。
當然這計算方法是基于熒光定量的數學計算模型簡化來的,平時使用沒什么問題,如果兩個目的基因的擴增效率不一樣,這個計算方法是不能用的。
擴展資料:
熒光定量PCR應用領域
臨床疾病診斷:各型肝炎、艾滋病、禽流感、結核、性病等傳染病診斷和療效評價;地中海貧血、血友病、性別發育異常、智力低下綜合癥、胎兒畸形等優生優育檢測;腫瘤標志物及瘤基因檢測實現腫瘤病診斷;遺傳基因檢測實現遺傳病診斷。
動物疾病檢測:禽流感、新城疫、口蹄疫、豬瘟、沙門菌、大腸埃希菌、胸膜肺炎放線桿菌、寄生蟲病等、炭疽芽孢桿菌。
食品安全:食源微生物、食品過敏源、轉基因、乳品企業阪崎腸桿菌等檢測。
科學研究:醫學、農牧、生物相關分子生物學定量研究。
應用行業:各級各類醫療機構、大學及研究所、CDC、檢驗檢疫局、獸醫站、食品企業及乳品廠等。
參考資料:百度百科-熒光定量PCR