電泳分離效果受到多種因素的影響，其中待分離生物大分子的性質(zhì)是關(guān)鍵。比如，大分子的電荷量、大小和形狀都會對其電泳遷移速度產(chǎn)生顯著影響。一般來說，電荷量越大、直徑越小且形狀越接近球形的大分子，其遷移速度越快。緩沖液的性質(zhì)對電泳也有重大影響。緩沖液的pH值直接影響大分子的解離程度，進而影響其帶電性質(zhì)。當緩沖液pH值距離大分子等電點越遠時，其凈電荷量增加，電泳速度也隨之加快。此外，緩沖液的離子強度也很關(guān)鍵。它需要保持在0.02－0.2之間，以確保電泳過程中大分子電荷的穩(wěn)定性和緩沖液pH的穩(wěn)定性。過高或過低的離子強度都會影響電泳速度。電場強度是另一個重要因素。電場強度越大，電泳速度越快。然而，過高的電場強度會導(dǎo)致電流增大，增加電泳過程中的熱量產(chǎn)生。電泳過程中電流所做的功大部分會轉(zhuǎn)化為熱能，導(dǎo)致介質(zhì)溫度升高，從而影響樣品和緩沖離子的擴散速度，樣品分離帶加寬，甚至引起對流，導(dǎo)致待分離物的混合。電滲現(xiàn)象也會影響電泳效果。電滲是液體在電場中的相對移動，由支持介質(zhì)表面的帶電基團引起。玻璃表面帶負電時，會吸附溶液中的正電離子，形成向負極的電滲流。如果電滲方向與待分離分子電泳方向一致，則會加快電泳速度；反之，則降低電泳速度。支持介質(zhì)的篩孔大小同樣會影響電泳遷移速度。在篩孔較大的介質(zhì)中，大分子的遷移速度較快，而在篩孔較小的介質(zhì)中，遷移速度較慢。因此，在選擇電泳介質(zhì)時，需根據(jù)待分離生物大分子的性質(zhì)進行調(diào)整。