在實驗室中，菌種的傳代保藏過程需要細致規劃，以確保菌種的穩定性和有效性。首先，根據菌種說明書的要求，復溶菌粉并轉種至增菌培養基中，待復壯后再轉接到平板上。在適當的溫度下培養，分離出單個純種菌落，這被稱為第二代菌種（G2）。之后，完成菌種鑒定，從純菌落中制備濃菌懸液用于甘油冷凍管的制備，同時選取純菌落制備斜面作為工作用菌種。此時，保藏菌種為第二代，而工作用菌種則為第三代。將第二代菌種管冷凍保存，而工作用菌種則需在適當溫度下培養一段時間，以便用于后續試驗。取一支冷凍保存的G2代菌種轉種到平板和斜面上，平板上的菌種制成冷凍保藏管，這被標記為第三代（G3），而斜面上的菌種則繼續用作工作用菌種（W3）。將第三代菌種冷凍保存，同時對G2菌種進行滅菌處理后丟棄。當工作用菌種代數小于5時，可以直接用上一代工作用菌種轉接下一代工作用菌種。例如，W3可以直接轉接到W4。按照上述方法操作，直到G4轉為W5，此時需要重新開啟安瓿，再次重復上述操作程序、保藏和使用菌種。在上述過程中，菌種被分為兩類：傳代用菌種和工作用菌種。傳代用菌種用于甘油冷凍管法保藏，而工作用菌種則用斜面低溫保藏法保藏。實驗證明，甘油冷凍管法的保存期限至少為兩年，這種方法適用于細菌（需氧）和酵母菌的傳代、保藏，對于厭氧菌、真菌和芽孢類細菌則需采用其他方法。因此，采用合適的菌種保藏方法對實驗的成功至關重要。通過合理的菌種傳代和保藏流程，可以確保實驗過程中菌種的穩定性和有效性，從而提高實驗結果的可靠性和可重復性。