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亞細胞提取液比例

導讀1、采集水稻新鮮樣品,用去離子水清洗3次,分開根和莖稈兩部分。2、準確稱取植株鮮樣0.5000克,將樣品剪成約2mm的小段,在預冷的研缽下加入液氮研磨,研磨成粉末后放入4攝氏度下保存,后續(xù)所有的操作步驟都在4℃進行。3、采用分級離心法分離細胞不同組分,亞細胞各組分提取劑為:250毫摩爾每升,蔗糖50毫摩爾每升,trisHCl1.0毫摩爾每升二硫赤蘚糖醇、5.0毫摩爾每升抗壞血酸、百分之1.0(質量分數(shù))PolyclarATPVPP,pH為7。4、樣品和提取劑以1:5的比例充分混合,用240微摩爾每升尼龍膜過濾,尼龍膜上殘骸作為細胞壁組分。5、上清液在500離心20min后,沉淀為細胞器組分,上清液繼續(xù)在65000離心3小時,所得上清液為可溶性組分。

您要問的是亞細胞提取步驟嗎?1、采集水稻新鮮樣品,用去離子水清洗3次,分開根和莖稈兩部分。2、準確稱取植株鮮樣0.5000克,將樣品剪成約2mm的小段,在預冷的研缽下加入液氮研磨,研磨成粉末后放入4攝氏度下保存,后續(xù)所有的操作步驟都在4℃進行。3、采用分級離心法分離細胞不同組分,亞細胞各組分提取劑為:250毫摩爾每升,蔗糖50毫摩爾每升,trisHCl1.0毫摩爾每升二硫赤蘚糖醇、5.0毫摩爾每升抗壞血酸、百分之1.0(質量分數(shù))PolyclarATPVPP,pH為7。4、樣品和提取劑以1:5的比例充分混合,用240微摩爾每升尼龍膜過濾,尼龍膜上殘骸作為細胞壁組分。5、上清液在500離心20min后,沉淀為細胞器組分,上清液繼續(xù)在65000離心3小時,所得上清液為可溶性組分。6、將各組分移入三角瓶中,在電熱板上蒸發(fā)至5毫升左右,加入10毫升硝酸和3毫升高氯酸,消煮至澄清透明后定容,過濾后放入4攝氏度冰箱保存,待測。

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