高效液相色譜法，簡稱HPLC，是一種利用液體作為流動相的色譜技術，通過高壓輸液泵提供快速流動的液流，提高分離效率，結(jié)合高效固定相的色譜柱實現(xiàn)物質(zhì)分離與分析。非極性固定相如十八烷基鍵合相與極性流動相構(gòu)成反相色譜，反之為正相色譜。反相色譜因其成本低、應用廣而被廣泛采用。中國是茶的故鄉(xiāng)，制茶歷史源遠流長，品種繁多，包括綠茶、紅茶、烏龍茶、花茶、白茶、黃茶等。茶不僅有健身、治病的藥理功效，還富含營養(yǎng)，具有多酚類、生物堿、維生素等多種對人體有益的化學成分。茶多酚作為主要的呈味物質(zhì)，占干茶物質(zhì)的18%-36%，對血脂有降低作用，具有抗腫瘤、抗氧化、抗菌、抗病毒、調(diào)節(jié)免疫等多種功效。茶多酚主要包括兒茶素類化合物，占總茶多酚的50%-70%。茶葉指紋圖譜是一種利用茶葉內(nèi)含物質(zhì)特征構(gòu)建的圖譜，可反映茶葉的種類、產(chǎn)區(qū)、樹齡、特性和制成品的年份等信息。本實驗通過HPLC分離茶葉主要成分，為建立茶葉指紋圖譜提供基礎。實驗過程中可能引入雜質(zhì)，實驗結(jié)束后需清洗柱子。實驗儀器包括Agilent1100高效液相色譜儀和50ul微量注射器。實驗試劑包括甲醇、乙腈和甲酸。色譜條件為：色譜柱XB-Phenyl,5μm,4.6x150mm；柱溫室溫；流動相乙腈1%甲酸；檢測器DAD；檢測波長276nm；進樣體積20ul定量環(huán)，實際注射每次可控制在50ul；梯度洗脫。待測溶液配制：取兩種不同綠茶，分別標記為綠茶1、綠茶2，各取約0.8000g，用50ml沸水沖泡，分別在10min、30min取上清液，過0.45μm濾頭。色譜測定：開啟電腦和相關設備，設定操作條件，流量為1.00ml/min。待儀器穩(wěn)定后進樣，記錄各組分色譜峰的保留時間和峰面積，并打印測試報告。實驗結(jié)束后，清洗系統(tǒng)及色譜柱。