在單克隆抗體的制備過程中，第二次篩選是至關(guān)重要的步驟。它通過連續(xù)注射抗原來確保篩選出的雜交瘤細(xì)胞具有針對特定抗原決定簇的特異性。在實(shí)際免疫過程中，抗原決定簇刺激機(jī)體產(chǎn)生特定效應(yīng)B淋巴細(xì)胞，因此，從脾臟中取出的效應(yīng)B淋巴細(xì)胞具有不同的特異性。HAT培養(yǎng)液篩選出的雜交瘤細(xì)胞群也存在特異性的差異，因此需要進(jìn)一步篩選，以確保選出能夠產(chǎn)生針對預(yù)定抗原決定簇的特異性雜交瘤細(xì)胞。常見的篩選方法是有限稀釋克隆細(xì)胞法。首先，將雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行多倍稀釋，然后接種到多孔細(xì)胞培養(yǎng)板中，確保每個孔中僅含一個或幾個雜交瘤細(xì)胞。在理想情況下，當(dāng)30%的孔中沒有細(xì)胞時，可以確保剩余孔中存在單個細(xì)胞。通過這種方法，雜交瘤細(xì)胞可以克隆生長，最終選出能夠分泌預(yù)定特異性抗體的雜交細(xì)胞株進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一的抗體，專門針對某一特定抗原表位。這一技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。雜交瘤技術(shù)為單克隆抗體的制備提供了重要手段，使得科學(xué)家們能夠制備出針對特定抗原表位的抗體，從而在生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷治療中發(fā)揮重要作用。詳情