排卵試紙的準確性并不完全依賴于激素水平，而是基于尿液中的黃體生成激素（LH）峰值。通常，在排卵前24至48小時，女性尿液中的LH會達到峰值，這時使用排卵試紙檢測，結果會顯示為陽性，預示排卵可能在接下來的24至48小時內發生。排卵試紙的具體測試方法通常會在包裝上詳細說明，用戶應嚴格按照說明操作，以減少誤差。與早早孕試紙不同的是，排卵試紙不建議使用晨尿，而應盡量在每天同一時刻采集尿樣。采集尿液前兩小時內應減少水分攝入，以免尿樣稀釋影響LH峰值的檢測。對于月經周期規律的女性，應在預計排卵時間前14天開始連續六天每天測試；而對于月經周期不規律的女性，則通常在月經干凈后的第三天開始測，直到試紙上兩條線一樣深或第二條線比第一條線更深，這表明將在24至48小時內排卵。其他測試結果應參考說明書中的圖示。雖然排卵試紙使用方便，但由于制作過程和自測者個體差異等原因，其準確率大約為75%。有些人可能會連續幾天檢測出強陽性結果，這既可能預示排卵（通常發生在最后一天強陽性之后），也有可能表示沒有排卵。